Rejestracja

Please leave these two fields as-is:
UWAGA: Prosimy o rozwiązanie prostego równania matematycznego!
zamknij

Zaloguj się

Zapomniałeś hasła?

Jeżeli nie pamiętasz swojego hasła, wyślemy Ci nowe - wystarczy skorzystać ze specjalnego formularza
Przypomnij mi hasło

Zarejestruj się
Napisano: 04 listopada 2011

Liczba komentarzy: 0
Labowe „know-how”: podstawowe bufory

Drodzy Towarzysze doli i niedoli laboratoryjnej! Zapewne wielu z Was było kiedyś w potrzebie przygotowania podstawowych, wykorzystywanych na co dzień roztworów. Jeśli nie ufacie przepisom zaczerpniętym z sieci, sięgnijcie po te sprawdzone wielokrotnie w praktyce. Poniżej kilka przykładów podstawowych buforów (podane odważki oraz stężenia końcowe poszczególnych związków), które możecie w każdej chwili sporządzić sami.

 

 

[stężenie końcowe]

Bufor AP (na 100 ml):

10 ml 1M Tris-HCl pH 9.5          [100 mM]

2 ml 5M NaCl                                   [100 mM]

0,5 ml 1M MgCl2 [5mM]

(zalecana sterylizacja filtrowa)

 

Bufor do transferu (western blot , na 1 L):

3,03 g Tris-HCl                                [19,2 mM]

14,4 g glicyny                                  [288 mM]

200 ml metanolu                           [20%]

 

10x PBS (na 1L):

80 g NaCl                                            [1,37 M]

2 g KH2PO4 [14,7 mM]

11,1 g Na2HPO4 [78,1 mM]

2 g KCl                                                 [26,8 mM]

(jeśli celem jest użycie buforu w hodowlach komórkowych, czy tkankowych konieczna jest jego sterylizacja przez autoklawowanie)

 

20x SB  (na 1l):

45 g  kwasu borowego

8  g   NaOH

 

50x TAE (na 1 L):

242 g Tris’u

57,1 ml kwasu octowego (100%)

100 ml 0,5 M EDTA pH 8,5

Uwaga! Przy rozpuszczaniu EDTA w wodzie należy ustalić pH roztworu – w przeciwnym razie EDTA się nie rozpuści.

 

10x TBE (na 1 L):

108 g Tris-HCl

55 g kwasu borowego

40 ml EDTA (pH 8,5)

Uwaga! Przy rozpuszczaniu EDTA w wodzie należy ustalić pH roztworu – w przeciwnym razie EDTA się nie rozpuści.

 

10x TE (na 1 L):

100 ml 1M Tris-HCl pH 7.5        [100 mM]

40 ml 250 mM EDTA                    [10 mM]

(zalecana sterylizacja filtrowa)

 

10x TTBS

100 ml 10x PBS

5 ml 10% Tween20

 

Przygotowanie dobrego buforu jest proste.

 

AM

 

 

image_pdfimage_print
Podziel się ze znajomymi
Skocz do formularza

Komentarze 0

Nikt jeszcze nie skomentował tego wpisu, napisz coś!
  1. Dodaj komentarz
    (wymagany)
    (wymagany)
    (wymagany)

    Pola oznaczone znaczkiem W są obowiązkowe. Musisz wypełnić wszystkie pola wymagane, aby dodać komentarz.
    Twój adres email, który podasz nie zostanie opublikowany z Twoim komentarzem.

    W treści komentarza dozwolone są tagi XHTML: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <s> <strike> <strong>

do góry